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胎牛血清不同組分對昆蟲桿狀病毒復制的影響

胎牛血清不同組分對昆蟲桿狀病毒復制的影響

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目前,在動物疫苗生產中,為了降低生產成本,減少生物制品純化損失,減少由于不確定蛋白或血清組分帶來干擾或差異的風險,提高生物制品的安全性,大多數采用無血清培養基。
 
但在使用過程中,有些病毒,如口蹄疫病毒有時會出現細胞生長良好,但病毒產量不高的問題。為了克服這一問題,許多廠家在病毒生產過程中,還是要加入1%-3%的低濃度血清。
 
如果能把血清中不同組分對病毒復制的影響分析清楚,即哪些組分對病毒復制起促進作用,哪些組分起抑制作用,從而在疫苗生產中加入對病毒復制起促進作用的血清組分,去除那些對病毒復制有抑制作用的組分,則可以有效提高疫苗產量。
 
為此,蕊特生物通過親和凝膠層析柱法分離獲得血清中四個混合組分(S1、S2、S3和S4),并進行了病毒培養實驗,通過培養昆蟲桿狀病毒,觀察上述不同組分對病毒復制效率的影響。
 
 
【一】空斑實驗觀察病毒復制結果
 
通過空斑測定實驗發現,與FBS對比,S1樣本濃度在1.3%以上時,空斑數顯著增加。S2樣本的空斑數沒有增加,反而降低。S3樣本濃度在2.5%以上時,空斑數顯著增加,沒有S1顯著。S4樣本的空斑數變化無顯著差異。結果見表1、圖1-圖5。
 
 
【二】熒光強度觀察病毒復制結果
 
通過肉眼觀察熒光強度發現,與FBS對比,S1樣本隨著濃度升高,熒光強度顯著增強。S2樣本的熒光強度沒有增加。S3樣本濃度在2.5%以上時,熒光強度顯著增強。S4樣本的熒光強度沒有明顯變化。結果見圖6-圖10。
 
 
【三】流式細胞術檢測病毒復制結果
 
通過流式細胞術檢測發現,與FBS對比,S1樣本濃度在1.3%以上時,病毒數量顯著增多。S2樣本的病毒數量沒有顯著增加。S3樣本濃度在2.5%以上時,熒光強度顯著增多。上述實驗證實S4對病毒復制沒有明顯促進作用,故沒有進行流式檢測。結果見圖11-圖13。
【結 論】
 
1、血清樣本S1在濃度1.3%以上時,對于BAC的復制有促進作用;
2、S2沒有促進效果,反而隨著S2的濃度上升而出現抑制的情況;
3、S3在濃度2.5%以上時,同樣有著明顯促進作用;
4、S4的促進作用不顯著。
綜上所述:與原胎牛血清相比,添加單一血清組分S1對提高BAC病毒的復制效果更顯著。
 
 
【討 論】
 
上述研究系從胎牛血清中分離不同組分并觀察其對病毒復制的影響,初步證實分離出的組分S1對昆蟲桿狀病毒復制有明顯的促進作用。至于該組分是否對其它病毒復制有同等的促進作用,蕊特生物后續會進一步去驗證。上述研究成果《胎牛血清不同組分對昆蟲桿狀病毒復制的影響》一文已刊發于《中國獸藥雜志》2019年第2期(2019,53(2):11-16 )。點擊“查閱原文”。
 
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